山东医药

2017, v.57;No.1030(04) 1-4

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人Tudor-SN UTR片段荧光素酶报告基因表达质粒的构建及活性检测
Construction of human Tudor-SN UTR luciferase reporter gene expression plasmid and its activity detection

赵亚丽;苏超;甘世虎;任媛媛;高星杰;杨洁;何津岩;

摘要(Abstract):

目的为深入研究Tudor-SN蛋白本身在翻译水平的调控机制奠定基础。方法以HeLa细胞全基因组DNA为模板,PCR扩增出目的基因,利用双酶切的方法将目的片段连接到pGL3-Control载体上。再将构建成功的pGL3-5'UTR、pGL3-3'UTR重组质粒分别与内参海肾荧光素酶质粒瞬时共转染HeLa细胞,培养48h检测荧光素酶的活性。结果双酶切和基因测序法鉴定重组质粒构建成功,转染重组质粒后可检测到荧光素酶的活性;以pGL3-5'UTR质粒荧光素酶活性最高。结论成功构建了人Tudor-SN基因5'UTR和3'UTR序列的重组质粒,为研究Tudor-SN基因UTR区对翻译调控的影响奠定了基础。

关键词(KeyWords): 人Tudor-SN蛋白;5'UTR;3'UTR;重组质粒;荧光素酶

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation): 国家杰出青年基金资助项目(31125012);; 教育部“创新团队发展计划”(IRT13085);; 国家自然科学基金资助项目(31170830/31370749/31571380);; 天津市应用基础与前沿技术研究计划(青年基金项目)(15JCQNJC09900);; 天津医科大学青年基金项目(2015KYZQ03)

作者(Author): 赵亚丽;苏超;甘世虎;任媛媛;高星杰;杨洁;何津岩;

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参考文献(References):

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