荧光原位杂交技术诊断染色体嵌合型的实验研究

目的对染色体嵌合型的病例运用荧光原位杂交技术(F ISH)进行目标染色体诊断。方法对1例常规G带显色分析后疑似为性染色体嵌合体核型者,采用F ISH技术,应用F ITC、T exas red标记的X/Y染色体着丝粒部位α卫星重复序列探针进行检测,以确定嵌合染色体各型所占比例。结果G带染色核型分析诊断为45,X/47,XXX;G带显色后计数完整分裂相110个,其中45,X和47,XXX分别占78.18%和21.82%;F ISH后进行性染色体核型统计,共计数有杂交信号的细胞和分裂相700个,X和XXX分别占75.86%和24.14%;两种计数结果相比无统计学差异。结论与常规染色体核型分析方法比较,F ISH技术检测嵌合体核型能够观察到更多的分裂相,还可分析核膜完整染色体未分散的间期细胞,计数更多的细胞,为临床提供更准确的数据,且省时。

Midkine启动子调控的HSV-TK基因重组腺病毒的构建

目的构建以人m idk ine(M K)启动子调控的TK基因的重组复制缺陷型腺病毒。方法以A deno-XTM表达试剂盒为基础,应用分子克隆技术,将穿梭质粒pShu ttle的CM V启动子替换为M K启动子,并将由pHSV-106获取HSV-TK基因的编码序列亚克隆至其下游,酶切鉴定阳性重组穿梭质粒pShu ttle-M K-TK。通过I-C eu I和P I-SceI两个稀有酶切位点,将目的基因与腺病毒质粒DNA(pA deno-X)进行体外连接,获得含目的基因的重组腺病毒质粒DNA,后者经限制性内切酶Pac I切割后,两端露出反向末端重复序列(ITR),利用脂质体转染293细胞,获得含有目的基因重组腺病毒上清,PCR检测。结果酶切结果显示,M K启动子与TK基因均正向插入pShu ttle中,TK位于M K启动子的下游。PCR检测显示重组腺病毒中含有M K启动子及TK基因片段。结论体外连接法可成功构建以人M K启动子调控的TK基因的重组腺病毒。

三七皂苷Rg1对脑缺血后大脑皮质和海马BDNF蛋白的影响

目的探讨三七皂苷R g1对脑缺血后皮质和海马脑源性神经营养因子(BDNF)蛋白的影响。方法取60只成年雄性SD大鼠建立大脑中动脉缺血模型,2h后进行缺血再灌注并随机分为1、2、3、4、5组各12只,分别给予生理盐水5m g/kg、尼莫地平15m g/kg及三七皂苷R g1 50、100、200m g/kg腹腔注射,于第1、3天用4%多聚甲醛饱和苦味酸进行心脏灌注并处死动物,制作脑组织冰冻切片,采用兔抗BDNF(1∶500)抗体进行免疫组化ABC法染色,观察各组不同时间大脑皮质和海马BDNF蛋白灰度值及阳性神经元数量。结果大鼠大脑皮质和海马均可见BDNF蛋白阳性表达;3~5组BDNF蛋白的灰度值低于1、2组(P<0.05、<0.01),阳性神经元数量显著高于1、2组(P<0.05、<0.01);3、4组大脑皮质BDNF灰度值和阳性神经元数目均低于海马(P<0.05、<0.01)。结论三七皂苷R g1能增加大脑皮质和海马BDNF阳性神经元的数量和蛋白含量,两部位的观察指标有显著性差异。其机制可能是BDNF不仅存在于阳性神经元中,亦可能是不同部位脑组织对药物和脑缺血的反应性不同。

表皮细胞培养条件的优化

目的探讨生长因子(EGF)在人表皮细胞无血清培养中的作用,寻找较好组合,以期加快表皮细胞成皮。方法选择EGF、胰岛素、霍乱毒素、氢化考的松4个实验因素,每个因素设立4个浓度水平。利用L 16(4×4)正交表设计试验,考察不同培养条件对表皮细胞生长情况、克隆形成率的影响。结果EGF在无血清培养中对培养人表皮细胞的生长及增殖有明显促进作用(P<0.01),在一定范围内(5~20ng/m l)随EGF浓度提高,效应加强;胰岛素浓度在5g/m l时对培养细胞的生长及增殖影响最大;霍乱毒素浓度在4.2ng/m l时作用最好;氢化考的松作用不明显。EGF、胰岛素、霍乱毒素、氢化考的松分别取20ng/m l、5μg/m l、8.4ng/m l、0.2μg/m l浓度时细胞生长及增殖效果最好。结论采用此优化的培养方法,表皮细胞的生长比较迅速,分化不太明显,可保持较旺盛的增殖力。

紫杉醇致急性严重过敏反应1例

谷胱甘肽对DPN患者血浆内皮素水平的影响

雅皓乳膏治疗复发性口腔溃疡85例

rhG-CSF对脑梗死区周边神经元和星形胶质细胞的影响

将36只健康雄性SD大鼠随机分为观察组与对照组各18只,观察组于缺血再灌注后24h自颈部皮下注射重组人粒细胞集落刺激因子(rhG-CSF),1次/d,连用5d;对照组予等体积生理盐水。于缺血再灌注后7、14、21d分别处死6只大鼠,观察两组神经功能缺损评分及梗死区周边神经元和星形胶质细胞的特异性标记物微血管相关蛋白-2(M AP-2)和胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的表达。结果与对照组相比,观察组神经功能缺损评分较低,M AP-2表达增高而GFAP表达降低。提示rhG-CSF可抑制神经元死亡和胶质疤痕形成,从而减轻脑缺血再灌注损伤。

硫氮酮联合左卡尼汀治疗不稳定性心绞痛

为研究硫氮酮联合左卡尼汀治疗不稳定性心绞痛(UAP)的疗效,将60例同期收治的UAP患者随机分为治疗组及对照组各30例,其年龄、性别、病情等无显著差异(P>0.05)。两组均予阿司匹林、肝素、辛伐他汀等基础治疗,对照组在此基础上予硝酸甘油10m g+5%葡萄糖250m l(糖尿病患者用生理盐水)静滴,1次/d;治疗组予硫氮酮30m g、左卡尼汀2.0g分别加入5%葡萄糖250m l(或生理盐水)中静滴,1次/d。两组均连用10d为一疗程。治疗后治疗组症状有效率及心电图有效率(93.3%,70.0%)均显著高于对照组(63.3%,30.3%),P均<0.01。提示硫氮酮联合左卡尼汀治疗UAP效果确切。

生脉注射液治疗慢性肺源性心脏病顽固性心衰(附31例报告)

将131例肺源性心脏病顽固性心衰患者随机分为照组62例和观察组69例,均给予洋地黄、利尿剂及血管活性剂治疗,观察组在此基础上加用生脉注射液静滴。结果治疗组显效46例(66.67%),有效16例(23.19%),无效7例(10.14%),总有效率89.86%;对照组显效8例(12.90%),有效6例(9.68%),无效48例(77.42%),总有效率22.58%,两组总有效率比较差异显著(P<0.05)。观察组无明显副反应。认为生脉注射液静滴治疗肺心病顽固性心衰疗效肯定,且无明显毒副作用。

氦氖激光联合灯盏花素治疗脑梗死疗效观察

将65例脑梗死患者随机分为观察组43例和对照组22例,两组均予常规对症处理,对照组在此基础上予复方丹参液20m l,胞二磷胆碱0.5g加生理盐水500m l静滴(1次/d,10d为一疗程);观察组予灯盏花素15m l加5%葡萄糖盐水500m l静滴(1次/d,10d为一疗程),同时予氦氖激光血管内放射治疗。观察两组治疗前后血液流变学各项指标和临床疗效。结果观察组治疗后血液流变学指标有显著改善,有效率(93.02%)显著高于对照组(73%),提示灯盏花素联合氦氖激光血管内照射治疗脑梗死效果确切。

静舒氧对脑梗死患者血清sVCAM-1和sP-selectin的影响

将72例脑梗死患者随机分为对照组35例和静舒氧组37例。两组均予常规治疗,静输氧组在此基础上静滴静舒氧250m l/次,2次/d,连用15d。检测治疗前后两组血清可溶性血管细胞黏附分子(sVCAM-1)和可溶性P-选择素(sP-se lectin)浓度变化及疗效。结果静舒氧组基本痊愈率显著高于对照组(P<0.01),血清sVCAM-1和sP-se lectin的浓度明显低于对照组(P均<0.01)。认为早期对脑梗死患者行静舒氧治疗可减轻缺血脑细胞的损害,有利于病情恢复;其对脑缺血神经元的保护机制可能是抑制sVCAM-1和sP-se lectin的产生,从而阻断白细胞向缺血区的浸润。

阿司匹林对急性脑梗死患者血浆NO及GMP-140的影响

将69例急性脑梗死患者随机分为治疗组(35例)和对照组(34例),两组均予低分子右旋糖酐、胞二磷胆碱等基础治疗,治疗组在此基础上口服阿司匹林(150m g/d)15d。采用硝酸酶还原法和双抗体夹心酶联免疫吸附法分别测定两组治疗前后血浆一氧化氮(NO)及血小板α颗粒膜蛋白(GM P-140)含量。按照欧洲卒中评分(ESS)标准进行评分。治疗后治疗组血浆NO及GM P-140的水平显著低于治疗前和对照组(P<0.05);两组ESS分值均明显高于治疗前(P<0.05),但组间比较无明显差异(P>0.05)。认为阿司匹林能通过降低急性脑梗死患者血浆NO及GM P-140水平,减轻缺血性脑损伤,起到保护脑组织的作用。

支原体肺炎患儿血清T细胞亚群和IFN-TNF变化及其临床意义

采用流式细胞仪和酶联免疫方法检测31例支原体(M P)肺炎患儿(M P组)急性期、恢复期血清CD3、CD4、CD8、CD4/CD8、IFNγ-、TNF-α水平,并与非支原体肺炎患儿(对照组)比较。结果M P组急性期CD3、CD4、IFN-γ显著低于对照组(P<0.05),CD8无明显变化;TNF-α显著升高(P<0.01)。上述指标均于恢复期(4周后)恢复正常。提示M P患儿细胞免疫功能低下,治疗中应注意阻断TNF-α分泌,提高IFNγ-、CD4水平。

胸腺肽促进人肝癌细胞HepG2凋亡机制的研究

将对数生长期的人肝癌细胞H epG 2(3×104/m l)随机分为1、2、3、4组,1、2、3组分别用浓度为400、200、100μg/m l的胸腺肽1m l处理,4组用相同体积RPM I-1640培养液处理。免疫组化法检测H epG 2中p53、B c1-2、B ax蛋白的表达,用流式细胞术、琼脂糖凝胶电泳法检测细胞凋亡及死亡率。结果1、2、3组细胞凋亡率及死亡率均显著高于4组;随胸腺肽浓度升高,细胞死亡率升高。胸腺肽作用于H epG 2细胞24h后,琼脂糖凝胶电泳出现明显的DNA梯形条带,大约相当于180~200bp的整倍数,对照组无DNA梯形条带出现。荧光显微镜下可见H epG 2细胞缩小、染色质固缩,细胞核裂成碎片,但细胞形态仍完整。1、2、3组p53、B ax表达显著高于4组,P均<0.05;B c1-2表达显著低于4组,P均<0.05。提示胸腺肽可诱导人肝癌H epG 2细胞凋亡,其机理是上调p53、B ax表达,抑制B c1-2表达。

早期切痂治疗大面积烧伤效果分析

彩色多普勒在非特异性肠系膜淋巴结炎诊断中的应用

腹腔镜下精索内静脉高位结扎术治疗精索静脉曲张23例

对23例原发性精索静脉曲张患者行腹腔镜精索内静脉高位结扎术。结果顺利完成手术,手术时间35~65m in,平均42m in,术后当日可下床活动,无并发症发生,平均住院时间3d;精索静脉曲张消失或明显改善,术后半年随访未见复发及睾丸萎缩。认为腹腔镜精索内静脉高位结扎术具有视野清、恢复快等优点,为当前治疗精索静脉曲张的最佳手术方法之一。

雌激素受体α和β及孕激素受体在胃癌中的表达及意义

运用P ictureTM-PV 6000免疫组化技术检测48例胃癌及癌旁组织中雌激素受体α(ERα)和β(ERβ)、孕激素受体(PR)的表达。结果发现ERα和PR阳性染色只在细胞核内,在癌组织中表达阳性率分别为33.3%和29.2%,而癌旁组织均无表达,P<0.001;ERβ主要表达在细胞核内,在癌组织和癌旁组织表达阳性率分别为70.8%和72.9%,P<0.05。PR表达与ERα有高度相关性(P<0.01),而与ERβ无相关性。ERα和ERβ、PR三者共同表达阳性率18.75%,明显高于ERα、PR共表达(2.08%)或ERβ、PR共表达(6.25%),P<0.01。Borrm ann分型Ⅲ+Ⅳ型(浸润型癌)者ERα阳性率(42.4%)显著高于Borrm annⅠ+Ⅱ型(局限型癌)者(13.3%),P<0.05;有淋巴和远处转移者阳性率显著高于无转移者(P<0.05);ERα和孕激素受体在印戒细胞癌、黏液腺癌、低分化腺癌等分化低的胃癌中表达较高,在中、高分化胃癌中表达较低,但无显著差异,与年龄、性别、肿瘤大小、部位和浸润深度无明显相关性。认为ERα、ERβ及PR在胃癌中均有表达,ERβ占优势;ERα在胃癌中表达高于癌旁组织,并与胃癌Borrm ann分型、淋巴和远处转移相关。ERα、ERβ及PR阳性胃癌是性激素依赖性肿瘤,可行内分泌治疗,并应针对ERα和ERβ的不同表达选择药物。

PTSMA术治疗肥厚型梗阻性心肌病1例护理体会

66例老年白内障患者血清维生素E水平检测分析

钝钛板坚强内固定治疗下颌角骨折31例临床观察

急性肺栓塞18例诊治体会

回顾分析近期收治的18例急性肺栓塞(APE)患者的临床资料,认为:①血气分析可作为筛选方法;②一过性S1QⅡTⅡ及新出现的心电轴右偏为APE的特异性ECG改变;③核素检查肺灌注分布稀疏或缺损,肺通气正常;VCG检查右心房、右室扩大伴右心室运动异常,左心房、左心室缩小伴室间隔左侧移位等为APE特征性改变;④肺动脉造影是术前诊断APE的惟一可靠方法;⑤APE应及早行溶栓治疗。

血管内支架成形术治疗外科高危复杂型颅外血管阻塞性疾病(附7例报告)

对7例外科高危的复杂型颅外血管阻塞性疾病患者采用血管内支架成形术治疗。结果支架定位准确,4例患者血管狭窄完全消失,3例患者血管狭窄程度减少90%,临床症状改善明显,无手术并发症;术后随访3~23个月,均无短暂性脑缺血(T IA)发作或脑梗死发生。提示血管内支架成形术是治疗外科高危复杂型颅外血管阻塞性疾病安全而有效的方法,长期疗效有待进一步观察。

雌、孕激素受体,胰岛素生长因子-I及其受体在子宫肌瘤中表达的研究

采用免疫组化和流式细胞术方法检测了30例子宫肌瘤患者子宫肌组织及肌瘤组织中胰岛素样生长因子-Ⅰ(IGF-Ⅰ)、IGF-1受体(IEG-IR)、雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)的表达。结果发现IGF I与ER、PR表达关系密切,提示IGF-1在子宫肌瘤的发生过程中起调节作用。

雷帕霉素药物洗脱支架用于急诊PCI的安全性评价

110例起病12h内接受急诊经皮冠状动脉介入治疗(PC I)的急性心肌梗死(AM I)患者,按介入治疗时使用的支架分为雷帕霉素药物洗脱支架组(A组,50例)和金属裸支架组(B组,60例)。结果两组PC I术均获得成功;A组无1例发生急性和亚急性血栓形成,B组1例发生急性血栓形成。提示雷帕霉素药物洗脱支架应用于AM I是安全的。

D-J管递进式留置持续扩张术治疗尿道狭窄(附60例报告)

对60例尿道狭窄患者行D-J管递进式留置持续扩张术。术中根据尿道狭窄情况,用斑马导丝将3根D-J管经尿道通过狭窄段依次置入膀胱内,依靠两端的弯曲固定于尿道内,放置男用尿袋引流尿液,1~2周后更换递增型号的D-J管及尿袋,直至能放置3根8F的D-J管并带管6~8周;置管困难或狭窄道细、有假道、合并结石者采用骶管麻醉或尿道黏膜麻醉用腔镜,直视下置入D-J管,并处理假道或结石。结果本组均可扩张至置入3根8FD-J管,6~8周拔管后除1例仍排尿困难外,余均自行排尿通畅,随访1~3a,3例需定期做尿道扩张,其余无复发。认为D-J管递进式留置持续扩张术治疗尿道狭窄操作简单灵活、疗效确切、损伤轻、刺激小、恢复快,且能自洁尿道,可反复操作,值得临床推广应用。

新生儿膈疝修补术12例麻醉管理体会

尿激酶溶栓治疗急性脑梗死18例效果观察

吉西他宾在泌尿道移行细胞癌治疗中的应用

纳洛酮治疗胎儿窘迫54例分析

三镜联合治疗肝外胆管结石113例临床分析

早期“锁孔”开颅治疗高血压壳核出血76例体会

海妇洁膜的制备及临床应用

动脉粥样硬化药物治疗进展

带状疱疹三叉神经痛的治疗进展

血源性艾滋病高发村村民H IV传播相关行为因素调查分析

改良袢式胆肠内引流术治疗老年梗阻性黄疸23例

膝关节镜手术258例护理体会

氧气驱动雾化吸入辅助治疗小儿喘憋性肺炎63例护理体会